A级国产乱理伦片在线播放,少妇AV一区二区三区无码,亚洲av中文无码字幕色最,成人免费一区二区三区视频软件

繼發(fā)性登革熱IgG捕捉法檢測試劑盒

檢測程序

注： 確保所有試劑在開(kāi)始測定前平衡至室溫（20-25℃）。在所給時(shí)間和溫度范圍以外進(jìn)行測試可能產(chǎn)生無(wú)效的結果。不在預定時(shí)間和溫度范圍內的測試必須進(jìn)行重復。

ELISA程序

• 從鋁箔袋中取出所需數量的微孔板并插入測試條槽。陰性質(zhì)控品、陽(yáng)性質(zhì)控品和校準品各需5個(gè)微孔，一式三份。確保剩下未使用的微孔密封于鋁箔袋內。
• 使用適當的試管或微滴定板稀釋陽(yáng)性質(zhì)控品（P）、陰性質(zhì)控品（N）、校準品（CAL）和患者樣本。
  • 混合10μL血清與1000μL樣本稀釋劑?；旌暇鶆?。 

或者，

• 混合10μL血清與90μL樣本稀釋劑。取出20μL稀釋血清，加入180μL樣本稀釋劑?；旌暇鶆?。

• 吸取100 µL樣本稀釋劑、質(zhì)控品和校準品添加至對應的微孔中。
• 蓋住測定板并在37°C ± 1°C孵育30分鐘。
• 用稀釋后的清洗緩沖液洗6次（參考清洗程序）。
• 吸取100 µL HRP標記抗人IgG添加到每個(gè)微孔中。
• 蓋住測定板并在37°C ± 1°C孵育30分鐘。
• 用稀釋后的清洗緩沖液洗6次（參考清洗程序）。
• 吸取100 µL TMB添加到每個(gè)孔中。
• 在室溫（20-25℃）下孵育10分鐘，從第①次添加開(kāi)始計時(shí)。藍色將會(huì )顯現。
• 按照相同順序吸取100μL終止液添加到每個(gè)孔中，計時(shí)同TMB添加步驟?；旌暇鶆?。藍色將變成黃色。
• 在30分鐘內讀取每個(gè)孔在450nm波長(cháng)的吸光度，參考濾波器為600-650nm。

注： 如果使用雙波長(cháng)分光光度計，將參考濾波器設定在600-650nm之間。在沒(méi)有參考濾波器的情況下讀取450nm的微孔結果可能由于背景原因導致吸光度偏高。

清洗程序

為了清除未復合的樣本或成分，有效清洗是ELISA程序的關(guān)鍵步驟。

A.自動(dòng)洗板機

• *抽凈所有微孔。
• 在清洗循環(huán)期間將每個(gè)孔裝滿(mǎn)至邊緣（350μL）。
• 完成6次清洗后，將測定板倒立于吸水紙巾上用力敲打，確保清除所有清洗緩沖液。
• 為了確保有效清洗，必須維持自動(dòng)洗板機良好的保養。必須始終遵守廠(chǎng)商的清潔說(shuō)明。

B.手動(dòng)清洗

• 將測定板的內含物丟棄到適當的廢物容器。
• 用適當的擠壓瓶將微孔填滿(mǎn)清洗緩沖液。避免清洗緩沖液起泡，否則會(huì )降低清洗效率。立即丟棄微孔里的清洗緩沖液。
• 再將微孔填滿(mǎn)清洗緩沖液，并立即丟棄。
• 重復步驟（3）4次，共用清洗緩沖液清洗六（6）次。
• 后一次清洗完成后，丟棄微孔的內含物并將測定板置于吸水紙巾上敲打，以確保清除所有清洗緩沖液。

質(zhì)量控制

每個(gè)試劑盒包含校準品，陽(yáng)性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品。這些組成的可接受值參見(jiàn)附帶的規格表。陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品用于監測重大的試劑失敗。陽(yáng)性質(zhì)控品不能確保測定臨界值的精密度。如果質(zhì)控品或校準品的任一吸光度讀數不符合規定，則測試無(wú)效且應重新測試。如果測試無(wú)效，則不能報告患者結果。必須按照地方、州和/或聯(lián)邦法規或認證要求以及實(shí)驗室標準QC程序執行質(zhì)控（QC）要求。有關(guān)適當的QC操作規程指南，建議用戶(hù)參考CLSI C24-A和42 CFR 493.1256。

預期值和測試局限性

• 必須結合患者的臨床體征和癥狀來(lái)做臨床診斷。該試劑盒的結果本身并沒(méi)有診斷作用，應該與其他臨床數據和患者癥狀聯(lián)用。
• 陽(yáng)性預測值取決于病毒存在的可能性。只能檢測有臨床癥狀或疑似接觸過(guò)相關(guān)病毒的患者。
• 黃病毒屬內的血清型交叉反應（登革熱1、2、3、4，日本腦炎，西尼羅河病毒，墨累山谷腦炎等）在IgG， 水平上十分常見(jiàn)^3,4,5。在東南亞進(jìn)行的試驗表明90%的日本腦炎患者（n=20）的IgG間接結果大于10 Panbio單位。
• 利用地方人群測定了臨界值。 人群血清流行病學(xué)在不同地理區域應該隨時(shí)間而變化。終，臨界值需要根據對當地的研究進(jìn)行調整。
• 尚未確定目測結果判定的性能特征。
• ELISA篩選試驗結果表明登革熱感染的所有血清必須送到參考實(shí)驗室進(jìn)行陽(yáng)性確認和流行病學(xué)記錄。

性能特征

用Panbio Dengue IgG Indirect ELISA對386份經(jīng)過(guò)血凝抑制試驗（HAI）和ELISA方法的回顧性血清進(jìn)行檢測。這些血清包括來(lái)自以下組別的樣本：108份血清陰性樣本、84份原發(fā)性樣本、94份繼發(fā)性樣本和100份地方性樣本。 通過(guò)Panbio Dengue IgG Indirect ELISA 對這些血清樣本進(jìn)行檢測并將其結果與血清的登革熱感染狀態(tài)進(jìn)行對比，從而確定檢測的靈敏度、特異性和一致性。數據總結于表1。  

馬來(lái)西亞的一所大學(xué)通過(guò)基于世界衛生組織（WHO）標準的HAI試驗將115份血清樣本確定為原發(fā)性或繼發(fā)性登革熱感染。 該試驗組由23份原發(fā)性和92份繼發(fā)性登革熱樣本構成。

繼發(fā)性登革熱IgG捕捉法檢測試劑盒